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    當前位置:首頁  -  產品中心  -  PCR試劑盒  -  熒光-PCR法  -  48T表皮葡萄球菌(SE)核酸試劑盒價格

    表皮葡萄球菌(SE)核酸試劑盒價格

    產品簡介

    表皮葡萄球菌(SE)核酸試劑盒價格
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    蛻皮激素(標準品)硫酸肼

    脫水穿心蓮內酯(標準品)二水化鈣

    更新時間:2021-03-13
    訪問次數:714
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    組成及試劑配制:
    1、酶標板:一塊(96孔)
    2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
    3、 樣品稀釋液:1×20ml。
    4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
    5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
    注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。

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     產品名稱

     表皮葡萄球菌(SE)核酸試劑盒價格

     規格

     48T

     貨號

     LZP8105

    實驗過程:
    一、試劑準備
    1. DNA模板
    2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
    3.10×PCR Buffer
    4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
    5.Taq酶
    二、操作步驟
    1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
    10×PCR buffer             5μl
    dNTP mixl                 4μl
    引物1(10pM)               2μl
    引物2(10PM)              2μl
    Taq酶(2U/μl)            1μl
    DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
    ddH2O至               50 μl
    PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
    2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
    3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
    4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
    三、注意事項
    1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行設立一個的PCR實驗室。
    2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
    3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
    4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
    5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續性。
    6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
    7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
    一、 試劑的準備
    從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
    設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
    試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
    熒光PCR反應液 14µL N×14µL
    酶混合物 1 µL N×1 µL
    總量 15 µL N×15µL
    1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
    7.2 qPCR反應條件
    將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
    推薦循環條件:
    1循環 50℃ for 2 min
    預變性 1循環 95℃ for 10 min
    PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
    60℃ for 60 sec
    60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
    松脂二葡萄糖苷(標準品)四化硅

    酸棗仁皂苷A(標準品)化鋯

    酸棗仁皂苷B(標準品)五化

    穗花杉雙黃酮(標準品)硫酸鐵

    梭砂貝母(標準品)環戊

    特女貞苷(標準品)四氫噻吩-酮

    天麻素(標準品)氧基甲

    天麻素2-吡咯甲

    甜菊苷(標準品)5-噻唑甲

    土貝母苷甲(標準品)高酸鎂

    土荊皮酸(標準品)化氫

    土木香內酯(標準品)硫酸氫鈉

    蛻皮激素(標準品)硫酸肼

    脫水穿心蓮內酯(標準品)二水化鈣

    脫水穿心蓮內酯琥珀酸半酯(標準品)1-并呋喃-5-甲

    脫水羊藿素(標準品)N,N-二基二

    脫氧野尻霉素(標準品)甲基吡啶氧化物

    10-脫酰巴卡亭(標準品)甲基吡啶氧化物

    酸化APP(Tyr757)淀粉樣肽前體蛋白CK17/FITC  熒光素標記細胞角蛋白17IgG200 ul

    絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶ATRPhospho-Cytokeratin 17 (Ser44) /FITC  熒光素標記酸化細胞角蛋白17IgG100 ul

    去整合素樣金屬蛋白酶18CK18/FITC  熒光素標記細胞角蛋白18IgG100 ul

    活化轉錄因子6CK18(C-rm) /FITC  熒光素標記細胞角蛋白18(C端)IgG20 ul

    銜接蛋白βCK18/FITC  熒光素標記細胞角蛋白18IgG100 ul

    銜接蛋白γ/γ-AdaptinCK19/FITC  熒光素標記細胞角蛋白19IgG100 ul

    水通道蛋白-9CK19/Gold  膠體金離子標記細胞角蛋白19IgG100 ul

    膜粘連蛋白A3CK19/FITC  熒光素標記細胞角蛋白19IgG20 ul

    膜粘連蛋白 A4CK19/RBITC  紅色熒光素羅丹明標記細胞角蛋白19IgG100 ul
    表皮葡萄球菌(SE)核酸試劑盒價格心動加速蛋白多肽抗體Platyphyllol中文名:別名:分子式:C19H22O4

    毒蕈堿型乙酰膽堿受體M3抗體Rhuscholide A中文名:別名:分子式:C31H42O3

    鉀通道相互作用蛋白3抗體Centrolobol中文名:別名:分子式:C19H24O3

    氯離子通道調節蛋白1A抗體Platyphyllene中文名:別名:分子式:C19H20O3

    磷酸化心肌肌鈣蛋白抗體2,3,5,4'-Tetrahydroxystilbene 2-O-glucoside中文名:別名:分子式:C20H22O9

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