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    當前位置:首頁  -  產品中心  -  PCR試劑盒  -  熒光-PCR法  -  48T豬肺炎支原體(MHP)核酸試劑盒價格

    豬肺炎支原體(MHP)核酸試劑盒價格

    產品簡介

    第八凝血因子/第八因子相關抗原抗體1-Acetylpiperazine中文名:1-乙酰別名:分子式:C6H12N2O

    凝血因子11重鏈抗體(1S,2R)-2-Ami-1,2-diphenylethal中文名:(1S,2R)-2-氨基-1,2-二苯基乙醇別名:分子式:C14H15

    凝血因子12輕鏈抗體

    更新時間:2021-03-13
    訪問次數:733
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    注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。

     產品名稱

     豬肺炎支原體(MHP)核酸試劑盒價格

     規格

     48T

     貨號

     LZP7973

    組成及試劑配制:
    1、酶標板:一塊(96孔)
    2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
    3、 樣品稀釋液:1×20ml。
    4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
    5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
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    實驗過程:
    一、試劑準備
    1. DNA模板
    2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
    3.10×PCR Buffer
    4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
    5.Taq酶
    二、操作步驟
    1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
    10×PCR buffer             5μl
    dNTP mixl                 4μl
    引物1(10pM)               2μl
    引物2(10PM)              2μl
    Taq酶(2U/μl)            1μl
    DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
    ddH2O至               50 μl
    PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
    2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
    3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
    4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
    三、注意事項
    1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行設立一個的PCR實驗室。
    2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
    3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
    4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
    5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續性。
    6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
    7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。
    孔雀石綠PKM2 (D78A4) XP® Rabbit mAbL-賴氨酸

    燦爛綠,亮綠Phospho-Drosophila Akt (Ser505) Antibody6-甲氧基-2,3,4,5-四氫吡啶

    甲基綠THEX1 (D66A11) Rabbit mAb2,二-5-甲基吡啶

    茜素綠;酸性綠25Phospho-Akt (Thr308) (244F9) Rabbit mAb(R)-縮水甘油

    萘酚綠BPhospho-Akt (Thr308) (244F9) Rabbit mAb氧甲酰基亞基三基膦

    固綠FCFPhospho-Akt (Ser473) (193H12) Rabbit mAb甲酸

    子種綠A;藍APhospho-Akt (Ser473) (193H12) Rabbit mAb2-甲氧基基酸

    亮綠SF(淡黃)Phospho-Akt (Ser473) (193H12) Rabbit mAb甲氧基酸

    健那綠BAkt3 Antibody2,3,4,6-四酰氧基-alpha-D-吡喃葡萄糖溴化物

    酸性綠3CNOT3 (D4K4N) Rabbit mAb1-叔丁氧羰基哌

    酸性綠 50 Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAb-2-吡啶甲酸

    酸性綠APhospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAb2-溴蒽醌

    吲哚菁綠Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAbN-BOC-GAMMA-氨基丁酸

    靛藍N-Cadherin Antibody9-溴菲

    甲基藍CD6 (E9Y7Y) Rabbit mAb戊鈉

    伊文思藍;埃文斯藍MST3b Antibody2-氨基--6-甲氧基嘧啶

    曲利藍LSD1 (1B2E5) Mouse mAb5--2-氟

    維多利亞藍B,性藍 26CXXC1 (D1R5R) Rabbit mAb2-溴-5-氟

    N-甲基-D-天門冬氨酸(NMDA)受體亞單位NR2 ELISA試劑盒TRBF1/TRF1  端粒體復制結合因子1100 ul

    N端前腦鈉素(NT-proBNP)ELISA試劑盒TREM1  髓系細胞觸發受體1100 ul

    NOGO-A ELISA試劑盒TREM2  髓系細胞觸發受體220 ul

    Na-K-ATP酶ELISA試劑盒TREML1/TLT1  髓系細胞觸發受體樣轉錄因子1100 ul

    NAD(P)H脫氫酶(醌)1(NQO1)ELISA試劑盒TREML2/TLT2  髓系細胞觸發受體樣轉錄因子2100 ul

    M型肌酸激酶(CKM)ELISA試劑盒Transferrin  轉鐵蛋白100 ul

    L選擇素(L-Selectin/CD62L)ELISA試劑盒TRF2  端粒結合蛋白2100 ul

    L-酸脫氫酶(L-LDH) ELISA試劑盒omerase Binding Proin, P23  端粒酶結合蛋白P23100 ul

    KiSS-1受體(KISS1R)ELISA試劑盒TRIM32  TRIM3220 ul
    豬肺炎支原體(MHP)核酸試劑盒價格纖維母細胞生長因子受體底物3抗體7-Acetoxy-4-methylcoumarin中文名:7-乙酰氧基-4-甲基別名:分子式:C12H10O4

    纖維連接蛋白抗體Adresterone中文名:腎上腺甾酮別名:分子式:C19H24O3

    凝血因子8/第八凝血因子/第八因子相關抗原抗體1-Acetylpiperazine中文名:1-乙酰別名:分子式:C6H12N2O

    凝血因子11重鏈抗體(1S,2R)-2-Ami-1,2-diphenylethal中文名:(1S,2R)-2-氨基-1,2-二苯基乙醇別名:分子式:C14H15

    凝血因子12輕鏈抗體2-Acetylbutyrolactone中文名:2-乙酰基丁內酯別名:分子式:C6H8O3
    檢測步驟:
    一、 試劑的準備
    從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
    設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
    試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
    熒光PCR反應液 14µL N×14µL
    酶混合物 1 µL N×1 µL
    總量 15 µL N×15µL
    1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
    7.2 qPCR反應條件
    將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
    推薦循環條件:
    1循環 50℃ for 2 min
    預變性 1循環 95℃ for 10 min
    PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
    60℃ for 60 sec
    60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。

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