蛋白質(zhì)羰基測(cè)試盒微量法

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商品介紹：

測(cè)定意義

蛋白質(zhì)羰基是多種氨基酸在蛋白質(zhì)的氧化修飾過程中的早期標(biāo)志，其含量高低表明蛋白質(zhì)氧化損傷程度的大小，是衡量蛋白質(zhì)氧化損傷的主要指標(biāo)。

測(cè)定原理：

羰基與2,4-二硝基肼反應(yīng)生成紅色2,4-二硝基腙，在370nm處有特征吸收峰。

需自備的儀器和用品：

天平、恒溫水浴鍋、低溫離心機(jī)、漩渦震蕩儀、紫外分光光度計(jì)、1 mL石英比色皿和蒸餾水，無水乙醇，乙酸乙酯。
特點(diǎn)：

1、優(yōu)化設(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)方案，1小時(shí)即可完成

2、靈敏度高，操作便捷

3、試劑盒提供檢測(cè)果糖所需的全套試劑

常見樣本處理方法：

1、血清（漿）樣品：直接檢測(cè)。

2、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備： 細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量

（104個(gè)）：提取液體積（mL）為500~1000：1 的比例（建議 500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL提取液） ，超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率20％或200W，超聲 3s，間隔10s，重復(fù)30 次）8000g 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測(cè)。

組織：按照組織質(zhì)量（g） ：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g組織，

加入 1mL提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。

測(cè)定步驟：

1.加樣

1. 除包被外都需45度加樣

2.加樣體積要準(zhǔn)確

3.管底加樣，不能加在管壁上

4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡

2.溫浴

1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后，應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。

2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。

3.為避免蒸發(fā)，板上應(yīng)加蓋，或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。

4.加入底物后，反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上，以便不時(shí)觀察，待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí)，即可終止酶反應(yīng)。

3.洗滌

1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟，但卻是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。

2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。

4.讀板

1.陰性對(duì)照顏色極淺，在定性測(cè)定中一般可采用目視比色。

2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果，準(zhǔn)確性決定于ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì)量和軟件的算法。

鈣結(jié)合蛋白(CR)檢測(cè)試劑盒澤蘭黃三辛化銨(R=C8-C10)  90%2,4,6-三氟苯 96%

鈣結(jié)合蛋白(CR)檢測(cè)試劑盒澤瀉AN-丁溴化吡啶 99%2-(三氟)苯  97%

骨形成蛋白6(BMP-6)檢測(cè)試劑盒澤瀉A-24-醋酯;芐三丁化銨 98%4-三氟氧苯  98%

骨形成蛋白6(BMP-6)檢測(cè)試劑盒澤瀉B1-丁吡啶鹽鹽 98%3-(三氟氧)苯  98%

脂肪結(jié)合蛋白(FABP)檢測(cè)試劑盒 澤瀉B醋酯芐三丁 99%2-(三氟氧)苯 97%

脂肪結(jié)合蛋白(FABP)檢測(cè)試劑盒 澤瀉F芐三苯溴化膦 98%2,4,5-三溴咪唑 98%

腺苷三磷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體A1(ABCA1)檢測(cè)試劑盒 獐牙菜苷丁三苯化膦 98%3,4,5-三氟苯 97%

腺苷三磷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體A1(ABCA1)檢測(cè)試劑盒 獐牙菜苦苷芐三 98%2,3,4-三氧苯 98%

羥脯氨糖蛋白(HRGP)檢測(cè)試劑盒樟腦芐三氫氧化銨 20%溶液2- 98%

羥脯氨糖蛋白(HRGP)檢測(cè)試劑盒掌葉防已丁三苯溴化膦 99%3- 97%

葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(GLUT1)檢測(cè)試劑盒蔗糖代十八烷 98%3,4,5-三氧苯 97%

葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(GLUT1)檢測(cè)試劑盒正;丁酞內(nèi)酯代十二烷 98%間三氟 97%

低密度脂蛋白(LDL)檢測(cè)試劑盒正十二烷巨大戟酯十二烷三苯溴化膦 98%3-乙烯苯 96%

低密度脂蛋白(LDL)檢測(cè)試劑盒支脫皂苷元1-乙吡啶鹽鹽  98%4-乙烯苯 96%

花生四烯(AA)檢測(cè)試劑盒芝麻酚1-乙吡啶氫鹽  99%二苯 CP，98%(二苯異構(gòu)體+乙苯）

花生四烯(AA)檢測(cè)試劑盒芝麻林素乙氧酰乙三苯溴化膦 95%二苯 AR,99.0%
蛋白質(zhì)羰基測(cè)試盒微量法Cy5.5標(biāo)記的羊抗豚鼠IgG阿西替尼Human, Mouse, Rat

Cy7標(biāo)記的羊抗豚鼠IgG埃博霉素B；帕土匹龍Human, Mouse

PE標(biāo)記的羊抗豚鼠IgG埃博霉素CHuman, Mouse, Rat

PE-Cy3標(biāo)記的羊抗豚鼠IgG埃博霉素DHuman, Mouse, Rat

PE-CY5標(biāo)記的羊抗豚鼠IgG埃羅替尼Human, Mouse

APC標(biāo)記的羊抗豚鼠IgG艾力替尼磺鹽(AST1306)Human

Alexa Fluor 350標(biāo)記的羊抗豚鼠IgG（三水）Human

Alexa Fluor 488標(biāo)記的羊抗豚鼠IgG氨Human, Mouse

Alexa Fluor 555標(biāo)記的羊抗豚鼠IgG奧拉帕尼Human, Mouse, Rat

注意事項(xiàng)：

①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。

②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。

③按說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。

④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。

⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。

⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器 。

⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。

⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。

⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。