TNFα腫瘤壞死因子αELISA試劑盒

樣本實驗前準備：

ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。

（1）血清

室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

（2）血漿：

應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

（3）尿液：

用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。

（4）細胞培養上清：

檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。

（5）培養細胞

檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

（6）組織標本

切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

產品屬性：

檢測程序：

1.  加樣：每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ，將反應板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。

2.  洗板：用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次，向濾紙上印干。

3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。

4.  洗板：同前。

5.  每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0 分鐘。

操作步驟：

1.標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

2.加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。

3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。

5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。

6.加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。

7.溫育：操作同3。

8.洗滌：操作同5。

9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘。

10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。

11. 測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

標本要求：

1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融。

2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

需要而未提供的試劑和器材：

1. 產品僅用于科研標準規格酶標儀

2. 高速離心機

3. 電熱恒溫培養箱

4. 干凈的試管和Eppendof管

5. 系列可調節移液器及吸頭，一次檢測樣品較多時，用多通道移液器

6. 蒸餾水，容量瓶等。

備試劑與收集血樣：

1.  收集標本：血清、血漿（EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝）、細胞培養上清液、組織勻漿等盡早檢測， 2-8 ℃ 保存48 小時；更長時間須冷凍（ -20   ℃或 -70   ℃ ）保存，避免反復凍融。

2.  標準品液配制：使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻，配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設標準 管 8 管，管加標本稀釋液 900ul ，第二至第八管加入標本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標準品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ，移至第二管 。如此反復作對倍稀釋，從第七 管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對照。

3.  10× 標本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋（ 示例： 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水）。

4.  洗滌液：用重蒸水 1:20 稀釋（示例：1ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水）

鉤端螺旋體IgG(Lep IgG)試劑盒水甘草硒粉 99.9% metals basis,200目氟化釔 powder, 99.99% metals basis

鉤端螺旋體IgG(Lep IgG)試劑盒水合氧化前胡素硒粉 ≥99.99% metals basis,200目氟化鐿 99.99% metals basis

阿米巴(Amebiasis)試劑盒水黃皮素硒粉 ≥99.999% metals basis，-100mesh，powder硫鐿,八水 99.9% REO

阿米巴(Amebiasis)試劑盒水晶蘭硒 ≥99.9999% metals basis,Powder硫釔(III),八水 99.9% metals basis

白喉抗體(Diphtheria Ab)試劑盒水蘇硒 99.999% metals basis，1-6MM particle size 乙 98%

白喉抗體(Diphtheria Ab)試劑盒水蘇糖硒 ≥99.9999% metals basis,Powder,不規則顆粒三聚 99%

囊蟲病抗體(CYT Ab)試劑盒水仙* 99.99% metals basis,薄片二二酯 98%

囊蟲病抗體(CYT Ab)試劑盒水仙環素二氧化碲 99.99% metals basis二二乙酯 99%

布魯氏菌抗體IgG(Brucella Ab IgG)試劑盒水楊二氧化碲 99.999% metals basis二二異酯 99%

布魯氏菌抗體IgG(Brucella Ab IgG)試劑盒水楊碲粉   粉末,99.99% metals basis,100目乙二四乙鐵鈉  13.5-18.5% Fe basis

水痘帶狀皰疹病IgM(VZV-IgM)試劑盒水楊酯碲  粒狀，2-3cm,99.999% metals basis乙乙酯 99%

水痘帶狀皰疹病IgM(VZV-IgM)試劑盒絲石竹皂元3-O-B-D葡萄糖酯碲 7N乙二四乙四鈉 AR,99.0-102.0% (T)

水痘帶狀皰疹病IgG(VZV-IgG)試劑盒斯皮諾素高純錫 99.999% metals basis，1-6mm，顆粒亞氨二乙 95%

水痘帶狀皰疹病IgG(VZV-IgG)試劑盒四姜黃素錫 99.9999%乙酯 99%

軍團菌抗體IgA(LP Ab-IgA)試劑盒四氫表小檗碲化鋅 99.99% metals basis苯乙 99%

軍團菌抗體IgA(LP Ab-IgA)試劑盒四氫非洲防己碲化鋅 99.999% metals basis，塊狀，1-6mm AR，99.0%（劇品）
TNFα腫瘤壞死因子αELISA試劑盒本產品以焦油紫作為核心染料，焦油紫具有感光作用，能夠很好地顯示尼氏體的變化。尼氏體的存在和消失是神經細胞是否受損的重要指標，當發生腦炎、腦缺血、軸突反應等情況，尼氏體會發生溶解，甚至消失。可以用于石蠟組織切片的尼氏物質、神經元等的染色。

神經元細胞體包括一個具有皺褶核膜的大細胞核、稀疏的染色質和一個明顯的核仁。在細胞體中細胞質是尼氏顆粒，即能夠代表粗面內質網并在很多神經元中產生特異的斑點狀嗜堿性顆粒。尼氏顆粒可以用很多染色來顯示如中性紅、亞甲基藍、甲藍和甲基紫等。染色的變異、pH和分化的時間使一些染色既可以僅突出尼氏物質，也可以顯示神經元的細胞核和神經膠質。尼氏體(Nissl body)或稱尼氏小體是分布于神經細胞胞質內的三角形或橢圓形小塊狀物質，能被堿性染料如硫堇、甲藍和焦油紫等染料染成藍紫色。各種神經細胞內斗含有尼氏體，但其形狀、數量、分布位置常常不同。尼氏體會因生理狀態的變化而變化，是神經元內合成蛋白質的重要部位，當神經元受到刺激后，包體內的尼氏體會明顯減少。

儲存條件：常溫運輸和保存，有效期半年。