PREG孕烯醇酮ELISA試劑盒

產品屬性：

需要而未提供的試劑和器材：

1. 產品僅用于科研標準規格酶標儀

2. 高速離心機

3. 電熱恒溫培養箱

4. 干凈的試管和Eppendof管

5. 系列可調節移液器及吸頭，一次檢測樣品較多時，用多通道移液器

6. 蒸餾水，容量瓶等。

標本要求：

1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融。

2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

備試劑與收集血樣：

1.  收集標本：血清、血漿（EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝）、細胞培養上清液、組織勻漿等盡早檢測， 2-8 ℃ 保存48 小時；更長時間須冷凍（ -20   ℃或 -70   ℃ ）保存，避免反復凍融。

2.  標準品液配制：使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻，配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設標準 管 8 管，管加標本稀釋液 900ul ，第二至第八管加入標本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標準品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ，移至第二管 。如此反復作對倍稀釋，從第七 管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對照。

3.  10× 標本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋（ 示例： 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水）。

4.  洗滌液：用重蒸水 1:20 稀釋（示例：1ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水）

檢測程序：

1.  加樣：每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ，將反應板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。

2.  洗板：用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次，向濾紙上印干。

3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。

4.  洗板：同前。

5.  每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0 分鐘。

樣本實驗前準備：

ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。

（1）血清

室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

（2）血漿：

應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

（3）尿液：

用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。

（4）細胞培養上清：

檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。

（5）培養細胞

檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

（6）組織標本

切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

質金屬蛋白2/明膠A(MMP-2/Gelatinase A)試劑盒對乙烯愈瘡木酚3-[(3-膽固氨)二氨]-1-磺 98%吡啶-3，4-二羧 98%

質金屬蛋白2/明膠A(MMP-2/Gelatinase A)試劑盒磺對氧嘧啶2-環己乙磺 ≥99.0% (T)2,6-吡啶二 97%

質金屬蛋白13(MMP-13)試劑盒2-萘酚-8-磺4--7-硝-2,1,3-苯并氧雜惡二唑 98%4-苯磺酰異酯 96%

質金屬蛋白13(MMP-13)試劑盒磺異惡唑9，9-二-2，7-二溴芴 98%2-(三乙酰)吡咯 99%

質金屬蛋白10(MMP-10)試劑盒鹽環沙星二硫蘇糖 99%鹽多巴 98%

質金屬蛋白10(MMP-10)試劑盒高紫檀素  二硫蘇糖 用于分子生物學, ≥99%（±）-α-煙酚

質金屬蛋白1(MMP-1)試劑盒杠柳元二硫蘇糖 用于電泳, ≥99%反二 CP，99.0%

質金屬蛋白1(MMP-1)試劑盒甘油三酯1,8-二氮-9-芴 99%碳胍 99%

FMS樣酪氨激3(Flt3)試劑盒α-戊二N,N'-二環己-4-嗎啉脒 98%異抗壞血鈉 98%

FMS樣酪氨激3(Flt3)試劑盒D-熒光素鹽DNA ≥300 Kunitz units/mg protein三氧化二銻 SP

FMS樣酪氨激3配體(Flt-3L)試劑盒對羥苯乙3,3'-二氨聯苯 99%三氧化二銻 99.99% metals basis

FMS樣酪氨激3配體(Flt-3L)試劑盒毛花C3,3'-二氨聯苯 97%三氧化二銻 AR，99.5%

血管緊張素轉化(ACE)試劑盒毛旋花子K2,7-二溴芴 96%三氧化二銻 99.9%，平均粒徑：0.7 µm

血管緊張素轉化(ACE)試劑盒瑞鮑迪甙B2,6-二酚靛鈉鹽 AR三氧化二銻 99.999% metals basis

α1微球蛋白/bikunin前體(AMBP)試劑盒去氧脫水內酯3,5-二-2-羥苯磺鈉 99%三氧化二銻 CP，99%

α1微球蛋白/bikunin前體(AMBP)試劑盒磺舒 3,3'-二氨聯苯四鹽鹽水合物 98%β-氨乙酯鹽鹽 98%
PREG孕烯醇酮ELISA試劑盒乙酰氧甲基（AM）的酯衍生物及其螯合劑組成的熒光探針是進行多數活細胞研究時用到的廣泛的化合物。修飾過的羧與AM 酯基團可以生成不帶電荷的分子，具有細胞膜透性。但一進入細胞內，親脂性的保護集團發生非特異性的水解，從而生成帶電荷形式，滯留于胞內。通常情況下，AM 酯形式探針為無色無熒光狀態，除非發生水解，這一屬性對于儲存來說，也是非常有用的自發水解的判斷標準。

濃度：1 mg/mL in DMSO

儲存：-20℃，避光，有效期6個月

操作步驟：

1.標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

2.加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。

3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。

5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。

6.加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。

7.溫育：操作同3。

8.洗滌：操作同5。

9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘。

10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。

11. 測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。