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    當前位置:首頁  -  產品中心  -  科研抗體  -  一抗  -  0.2ml/200μg碳水化合物激酶結構域蛋白質抗體說明書

    碳水化合物激酶結構域蛋白質抗體說明書

    產品簡介

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    更新時間:2021-08-02
    訪問次數:457
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    免疫熒光技術的實驗步驟:
    一、準備好試劑與儀器:
    磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
    二、實驗步驟
    1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標本片上,十分鐘后棄去,使標本保持一定濕度。
    2.滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液,使其*覆蓋標本,置于有蓋搪瓷盒內,保溫一定時間以三十分鐘為參考。
    3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地搖晃振蕩。
    4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
    5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度。
    公司抗體僅用于科研現貨供應,質量有保證、*、實驗效果好,同時我司為您提供新價格、說明書、規格、用途、實驗原理等相關操作說明,歡迎前來選購!

    英文名稱 Anti-CARKD

    中文名稱  碳水化合物激酶結構域蛋白質抗體說明書

    Carbohydrate kinase domain containing; carbohydrate kinase domain-containing protein; FLJ10769; LP3298; NNRD_HUMAN.
    1mg/1ml

    0.2ml/200μg

    抗體來源 Rabbit

    克隆類型 polyclonal

    交叉反應 Human, Mouse, Rat

    產品類型 一抗

    研究領域 細胞生物 免疫學

    蛋白分子量 predicted molecular weight: 37kDa

    Lyophilized or Liquid

    KLH conjugated synthetic peptide derived from human CARKD

    IgG

    免疫熒光技術的實驗步驟:
    一、準備好試劑與儀器:
    磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
    二、實驗步驟
    1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標本片上,十分鐘后棄去,使標本保持一定濕度。
    2.滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液,使其*覆蓋標本,置于有蓋搪瓷盒內,保溫一定時間以三十分鐘為參考。
    3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地搖晃振蕩。
    4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
    5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度。

    圖片17.jpg 

    抗體的制備過程:
    1. 免疫原的制備
    普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
    小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯載體如BSA、OVA、HAS等。
    2. 免疫動物
    常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產時需要用到狗、綿羊、山羊等。
    3. 免疫血清的收集
    一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
    4. 免疫血清的純化與鑒定得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。
    5. 免疫血清的保存建議將抗體分裝后進行保存。抗體一般比較穩定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經除菌并添加防腐劑。

    實驗步驟:
    ① 滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標本片上,10min后棄去,使標本保持一定濕度。
    ② 滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液,使其*覆蓋標本,置于有蓋搪瓷盒內,保溫一定時間(參考:30min)。
    ③ 取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸3-5 min,不時振蕩。
    ④ 取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
    ⑤ 立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度,一般可用“+"表示:
    -)無熒光;(±)極弱的可疑熒光;(+)熒光較弱,但清楚可見;(++)熒光明亮;(+++ --++++)熒光閃亮。待檢標本特異性熒光染色強度達“++"以上,而各種對照顯示為(±)或(-),即可判定為陽性。
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