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    侵入性絲囊霉菌PCR檢測(cè)試劑盒廠家

    產(chǎn)品簡(jiǎn)介

    侵入性絲囊霉菌PCR檢測(cè)試劑盒廠家
    上海聯(lián)祖生物相關(guān)產(chǎn)品:
    GNRHR-Ab檢測(cè)試劑盒
    鑒定蠟樣芽孢桿菌常規(guī)生化反應(yīng)10項(xiàng),可鑒定分型(參考“食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB 4789.14-2010")蠟樣芽胞桿菌生化鑒定盒

    更新時(shí)間:2021-03-14
    訪問(wèn)次數(shù):631
    詳細(xì)介紹在線留言

    注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

     產(chǎn)品名稱

     侵入性絲囊霉菌PCR檢測(cè)試劑盒廠家

     英文名稱

     Aphanomyces invadansPCR

     貨號(hào)

     LZP6374

    組成及試劑配制:
    1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
    2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
    3、 樣品稀釋液:1×20ml。
    4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。
    5、 檢測(cè)稀釋液B:1×10ml。
    ?
    實(shí)驗(yàn)過(guò)程:
    一、試劑準(zhǔn)備
    1. DNA模板
    2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
    3.10×PCR Buffer
    4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
    5.Taq酶
    二、操作步驟
    1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
    10×PCR buffer             5μl
    dNTP mixl                 4μl
    引物1(10pM)               2μl
    引物2(10PM)              2μl
    Taq酶(2U/μl)            1μl
    DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
    ddH2O至               50 μl
    PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
    2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
    3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
    4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
    三、注意事項(xiàng)
    1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒(méi)有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
    2.純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
    3.所有試劑都應(yīng)該沒(méi)有核酸和核酸酶的污染。操作過(guò)程中均應(yīng)戴手套。
    4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌或高壓滅菌。
    5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量?jī)?chǔ)存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
    6.試劑或樣品準(zhǔn)備過(guò)程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
    7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開(kāi),并且要充分混勻。
    小鼠水通道蛋白9(AQP-9)elisa試劑盒Anti-CD2 Antibody研究領(lǐng)域  腫瘤 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 發(fā)育生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 干細(xì)胞  

    小鼠腎素前體elisa試劑盒Anti-CD2 Antibody研究領(lǐng)域  腫瘤 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 細(xì)胞凋亡 G蛋白偶聯(lián)受體  

    小鼠腎素(Renin)elisa試劑盒Anti-Cd2 Antibody研究領(lǐng)域  腫瘤 免疫學(xué) 生長(zhǎng)因子和激素  

    小鼠神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子3(NT-3)elisa試劑盒Anti-CD22 Antibody研究領(lǐng)域  腫瘤 免疫學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞粘附分子  

    小鼠熱休克蛋白60(Hsp-60)elisa試劑盒Anti-CD209 Antibody研究領(lǐng)域  腫瘤 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 神經(jīng)生物學(xué) 細(xì)胞粘附分子  

    小鼠前列腺酸性磷酸酶(PAP)elisa試劑盒Anti-CD200 Antibody研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 免疫學(xué) 細(xì)菌及病毒  

    小鼠腦啡肽原B(PDYN)elisa試劑盒Anti-CD22 Antibody(原貨號(hào)PB0731)研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 染色質(zhì)和核信號(hào) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 表觀遺傳學(xué)  

    小鼠免疫球蛋白E(IgE)elisa試劑盒Anti-CD209 Antibody研究領(lǐng)域  心血管 細(xì)胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 激酶和磷酸酶  

    小鼠抗小核糖核蛋白/Sm(snRNP/Sm)抗體elisa試劑盒Anti-CD22 Antibody研究領(lǐng)域  腫瘤 心血管 細(xì)胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 激酶和磷酸酶 細(xì)胞膜受體  

    小鼠胱天蛋白酶9(Casp-9)elisa試劑盒Anti-CD209 Antibody研究領(lǐng)域  腫瘤 細(xì)胞生物 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 生長(zhǎng)因子和激素 細(xì)胞類型標(biāo)志物 腫瘤細(xì)胞生物標(biāo)志物  

    小鼠谷氨酸脫氫酶(GDH/GLDH)elisa試劑盒Anti-CD24 Antibody研究領(lǐng)域  心血管 細(xì)胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞粘附分子 內(nèi)皮細(xì)胞 細(xì)胞骨架  

    小鼠肝臟型脂肪酸結(jié)合蛋白(L-FABP)elisa試劑盒Anti-CD244 Antibody研究領(lǐng)域  心血管 細(xì)胞生物 糖尿病  

    小鼠毒蕈堿型乙酰膽堿受體M2(mAChRM2)自身抗體elisa試劑盒Anti-CD244 Antibody研究領(lǐng)域  心血管 神經(jīng)生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 激酶和磷酸酶 細(xì)胞類型標(biāo)志物  

    小鼠催乳素釋放激素(PRH)elisa試劑盒Anti-CD274 Antibody研究領(lǐng)域  心血管 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 神經(jīng)生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 激酶和磷酸酶 細(xì)胞膜受體  

    小鼠白介素2受體β(IL2rb/CD122)elisa試劑盒Anti-CD274 Antibody研究領(lǐng)域  心血管 細(xì)胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 激酶和磷酸酶 細(xì)胞膜受體  

    BrucellaBrothAdditive

    MPC瓊脂培養(yǎng)基 MPC Agar Medium 奶制品中菌落總數(shù)測(cè)定(阻抗法)

    抗生素檢定培養(yǎng)基6號(hào) Antibiotic Agar No.6 250 粘菌素等的效價(jià)測(cè)定

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    脫羧酶對(duì)照試驗(yàn)培養(yǎng)基  Decarboxylase Cool Medium  5克  脫羧酶試驗(yàn)陰性對(duì)照(無(wú)基酸)

    精酸雙水解酶試驗(yàn)用培養(yǎng)基  AD  5克  細(xì)菌精酸水解試驗(yàn),假單胞菌屬鑒別;弧菌的精酸試驗(yàn)

    精酸葡萄糖斜面瓊脂  Arginine Dextrose Agar  100克  霍亂弧菌的復(fù)合生化試驗(yàn)

    苯丙酸瓊脂培養(yǎng)基  Phenylalanine Deaminase Medium  100克  細(xì)菌苯丙酸脫羧酶試驗(yàn)
    侵入性絲囊霉菌PCR檢測(cè)試劑盒廠家小鼠淋巴瘤細(xì)胞,YAC-1細(xì)胞1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶

    小鼠卵巢上皮癌細(xì)胞,ID8細(xì)胞1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶

    小鼠腦神經(jīng)瘤細(xì)胞,neuro-2a細(xì)胞1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶

    小鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞株,Bend.3細(xì)胞1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶

    小鼠逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝株,PT-67細(xì)胞1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶

    小鼠胚胎成骨細(xì)胞,MC3T3-E1細(xì)胞1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶
    檢測(cè)步驟:
    一、 試劑的準(zhǔn)備
    從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
    設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對(duì)照+1管陽(yáng)性對(duì)照),每個(gè)測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表:
    試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
    熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
    酶混合物 1 µL N×1 µL
    總量 15 µL N×15µL
    1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對(duì)照(NTC)和陽(yáng)性對(duì)照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
    7.2 qPCR反應(yīng)條件
    將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
    推薦循環(huán)條件:
    1循環(huán) 50℃ for 2 min
    預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
    PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
    60℃ for 60 sec
    60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請(qǐng)勿選擇ROX參比熒光。

     

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