大鼠淋巴成纖維細(xì)胞操作要點(diǎn)

大鼠淋巴成纖維細(xì)胞操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。

2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。

5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

AESgp130結(jié)合蛋白GAM抗體

AMHR2繆勒激素2型受體抗體

ACTR1激活素受體1A抗體

ACTR2激活素受體2A抗體

Activin Receptor Type IIB激活素受體2B抗體

C2orf88 2號(hào)染色體開放閱讀框88抗體

ARHGEF18G蛋白偶聯(lián)受體ARHGEF18抗體

Activin A Receptor Type IB激活素受體1B抗體

ARA24雄激素受體相關(guān)蛋白24抗體

Amyloid Precursor Protein淀粉樣肽前體蛋白抗體（C端）

ADCY2腺苷酸環(huán)化酶2抗體

APOC3載脂蛋白C3抗體

Apolipoprotein E4載脂蛋白E4抗體

AMBRA1自噬相關(guān)基因AMBRA1抗體

Phospho-ATG4C(Ser177)磷酸化自噬相關(guān)蛋白4C抗體

Phospho-ATG4C(Ser398)磷酸化自噬相關(guān)蛋白4C抗體

phospho-ASK1 (Ser966)磷酸化細(xì)胞凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激酶1抗體

phospho-ATXN1 (Ser775)磷酸化失調(diào)癥蛋白1抗體

ATXN1/Ataxin-1脊髓小腦失調(diào)癥蛋白1抗體

phospho-Amyloid Precursor Protein (Thr668)磷酸化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體

phospho-ASK1 (Ser967)磷酸化細(xì)胞凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激酶1抗體

phospho-ASK1 (Thr845)磷酸化細(xì)胞凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激酶1抗體

phospho-ATF2 (Thr69/71)磷酸化活化復(fù)制因子2抗體

Phospho-ATP1A1 (Tyr10)磷酸化鈉鉀ATP酶蛋白a1抗體

Phospho-ATP1A1 (Ser16)磷酸化鈉鉀ATP酶蛋白a1抗體

Phospho-Ack1 (Tyr859 + 860)磷酸化Ack1抗體

phospho-AMPK alpha-1(Ser485+Ser491)磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1抗體

phospho-AMPK beta 1 (Ser108)磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶β1抗體